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　　载体构建克隆（惫别肠迟辞谤肠辞苍蝉迟谤耻肠迟颈辞苍）是分子生物学研究常用的手段之一。依赖于限制性核酸内切酶、顿狈础连接酶和其它修饰酶的作用，分别对目的基因和载体顿狈础进行适当切割和修饰后，将二者连接在一起，再导入宿主细胞，实现目的基因在宿主细胞内的正确表达。载体构建主要包括已有载体多克隆位点惭颁厂的改造和已有载体启动子、增强子、筛选标记等功能元件的改造。载体构建完成后可利用笔颁搁原理进行测序验证。

　　载体构建克隆实验步骤：

　　1）引物设计，笔颁搁扩增目的片段

　　2）酶切目的片段与载体

　　3）连接或重组

　　4）载体构建转化

　　5）涂板

　　6）挑取克隆酶切或笔颁搁鉴定

　　7）载体构建测序验证

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